《免疫学和免疫学检验》 一、絮状沉淀试验

絮状沉淀试验为历史较久，又较有用的方法。该法要点是：将抗原与抗体溶液混合在一起，在电解质存在下，抗原与抗体结合，形成絮状沉淀物。这种沉淀试验受到抗原和抗体比例的直接影响，因而产生了两种最适比例的基本测定方法。

（一）抗原稀释法

抗原稀释法（Dean-Webb法）是将可溶性抗原作一系列稀释，与恒定浓度的抗血清等量混合，置室温或37℃反应后，产生的沉淀物随抗原的变化而不同。表12-1系以牛血清白蛋白为例的实验结果。

表12-1Dean-Webb定量沉淀试验

管号抗原抗体总沉淀量反应过剩物抗原沉淀量抗体沉淀量沉淀中Ab/Ag10.0030.680.093Ab0.0030.09030.020.0050.680.145Ab0.0050.14028.030.0110.680.249Ab0.0110.23821.740.0210.680.422Ab0.0210.40119.150.0320.680.571Ab0.0320.53916.860.0430.680.734－0.0430.69116.170.0640.680.720Ab－－－80.0850.680.601Ag－－－90.1710.680.464Ag－－－100.3410.680.368Ag－－－

单位：mmol/L

从表12-1可以看出，1～5管为抗体过剩管，7～10管为抗原过剩管，唯第6管沉淀物最多，两者之比为16:1，即最适比。

（二）抗体稀释法（Ramon）法

本法采用恒定的抗原量与不同程度稀释的抗体反应，计算结果同上法，得出的是抗体结合价和最适比。

现今，为了取得抗原与抗体的最佳比例，已将以上两法相结合，即抗原和抗体同时稀释，称为棋盘格法（亦称方阵法），找出最佳配比。举例见表12-2。

表12-2方阵最适比测定

抗体稀释度抗原稀释度1/101/201/401/801/1601/3201/6401/12对照1/5＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋±－－1/10＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－1/20＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－1/40－±＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－1/80－－－－＋＋＋＋－

“＋”为沉淀物量：为最适比

从表12-2可以看出，方阵法可较正确地找出抗原与抗体的最适比。如抗体用1:40。抗原则按1:320稀释；如抗原是1:160，抗本则用1:20最为恰当。