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测定脑脉康中冰片含量的新方法
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最近，第四军医大学西京医院药剂科研究人员经研究发现，采用高效液相色谱衍生化法测定脑脉康中的冰片含量，方法简单、准确、可行。
冰片具有通诸窍、散郁火、消肿止痛之功能，常用于内服及外用中成药中。有关冰片的含量测定方法，由于冰片化学结构无特征紫外吸收，因此主要采用薄层扫描法和气相色谱法。高效液相色谱仪是实验室常见分析仪器，适用于常见中成药成分的分离和测定，但对于紫外吸收弱的化合物直接检测较为困难。
根据冰片结构中含羟基的特点，3，5-二硝基苯甲酰氯可作为此类化合物的衍生化试剂，在叔胺或吡啶类化合物的催化下可和冰片反应生成具强紫外吸收的3，5-二硝基苯甲酸冰片酯。为建立一种测定脑脉康中冰片含量的新方法，研究人员利用此原理以反相高效液相色谱法对脑脉康中冰片的含量测定进行了方法学研究。他们将柱前衍生化在乙腈中反应，以3，5-二硝基苯甲酰氯为衍生化试剂（与冰片的摩尔比为20倍），4-二甲氨基吡啶为催化剂（与冰片的摩尔比为40倍）。然后用高效液相色谱法在ODS柱上，以甲醇:水（88：12）为流动相，检测波长225nm，测定脑脉康中冰片含量。
研究结果发现，冰片在1nmol~10nmol范围内，色谱峰面积与进样量呈线性关系（R2=0.9996，P<0.01）。两批脑脉康中冰片的含量分别为7.9%和7.1%，RSD分别为1.0%和1.5%（n=5）。平均回收率为99.9%，RSD为1.8%(n=4)。
据研究者介绍，冰片是一味常用中药，有合成和天然之分，主要成分是互为异构体的龙脑和异龙脑。其化学结构无特征紫外吸收，无法直接用实验室常见分析仪器高效液相色谱仪进行含量测定，因此采用衍生化高效液相色谱法是测定这类化合物较好的方法。冰片结构中含羟基，而3，5-二硝基苯甲酰氯是羟基化合物常用的衍生化试剂，在叔胺或吡啶类化合物的催化下可和冰片反应生成3，5-二硝基苯甲酸冰片酯，该新化合物具有较强的紫外吸收，龙脑和异龙脑在此色谱条件下显示为单峰，从而利用柱前衍生化反相高效液相色谱法间接完成了脑脉康中冰片的含量测定。此法采用的衍生化反应条件简单，衍生化产物稳定，样品前处理容易，具有较好的线性关系和回收率，有可能也适用于其他含冰片中成药的质量控制。