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为了正确应用免疫细胞化学标记手段在恶性淋巴瘤诊断,分型等方面发挥更大的作用应注意下列问题:①免疫细胞化学在恶性淋巴瘤分析中应紧密结合组织学改变,有目的地选用高效、广谱的抗体,淋巴瘤常用标记抗体见表12-4。因为免疫细胞化学的结果受到多种因素的影响,可以出现假阳性或假阴性;②为了避免因抗体标记的局限性而造成漏诊,有条件的单位最好一次用同功能的几种抗体,这样可以起来抗体间的反应互补性,往往比单项抗体的标记率高;③标本固定要及时,应用中性福尔马林液或B5固定液,则抗原保存要好一些。尽可能应用低压,低温(60℃以下)浸蜡,减少抗原的破坏丢失;④抗体的浓度要适当,消除背景染色。加用二甲砷酸钠可除去背景着色。特别膜标记阳性时与背景着色很难区分。前者包绕细胞呈环状;⑤每次染色应有阳性对照和阴性对照;⑥目前淋巴瘤的基因重排检测技术已经建立。特别是多聚酶链反应(PCR)扩增技术的应用,提供了特异(无假阳性),敏感(可检测出1/100万瘤细胞)快速(当天可出报告)的淋巴瘤检测手段。作者科室已建立了该项技术。虽然其设备条件要求比较高。可作为疑难、早期、化疗后残留病灶病例的确诊。
表12-4 淋巴瘤常用标记抗体
※可用石蜡切片标记的McAb
为了正确应用免疫细胞化学标记手段在恶性淋巴瘤诊断,分型等方面发挥更大的作用应注意下列问题:①免疫细胞化学在恶性淋巴瘤分析中应紧密结合组织学改变,有目的地选用高效、广谱的抗体,淋巴瘤常用标记抗体见表12-4。因为免疫细胞化学的结果受到多种因素的影响,可以出现假阳性或假阴性;②为了避免因抗体标记的局限性而造成漏诊,有条件的单位最好一次用同功能的几种抗体,这样可以起来抗体间的反应互补性,往往比单项抗体的标记率高;③标本固定要及时,应用中性福尔马林液或B5固定液,则抗原保存要好一些。尽可能应用低压,低温(60℃以下)浸蜡,减少抗原的破坏丢失;④抗体的浓度要适当,消除背景染色。加用二甲砷酸钠可除去背景着色。特别膜标记阳性时与背景着色很难区分。前者包绕细胞呈环状;⑤每次染色应有阳性对照和阴性对照;⑥目前淋巴瘤的基因重排检测技术已经建立。特别是多聚酶链反应(PCR)扩增技术的应用,提供了特异(无假阳性),敏感(可检测出1/100万瘤细胞)快速(当天可出报告)的淋巴瘤检测手段。作者科室已建立了该项技术。虽然其设备条件要求比较高。可作为疑难、早期、化疗后残留病灶病例的确诊。
表12-4 淋巴瘤常用标记抗体
CD常用名称抗原分子量(kD)反应细胞CD1T6,OKT6,Leu645胸腺细胞/Langerhans细胞CD2T11,OKT11,Leu550全T(E花结受体)CD3T3,OKT3,Leu419~29全T(T受体相关)CD4T4,OKT4,Leu355T辅助(NHc II类)CD5T1,OKT4,Leu167全T,偶BCD6T12,TU33120全T,偶BCD7CDLeu9,TU14,EA1※41全TCD8T8,OKT8,Leu232T抑制(TMHc I类)CD9J2,BA224T,B,髓细胞CD10J5,BA3,ViLA1100前,B前,生发中心(CALLA)CD11MO1,E11,MY894~155髓细胞,单核细胞CD13MY7(MCS—2 )160髓细胞,单核细胞CD14Mo2,MY4,UCHM155髓细胞,单核细胞CD15LeuM1※,,anti X-Hapten-粒细胞,单核细胞,R-S细胞,上皮细胞CD19B495全B(不包括浆细胞)CD20B135全B(不包括浆细胞)CD21B2145生发中心,套区和周围血B滤泡树突细胞CD22Leu14(To15),SHCL1135全BCD23TU1,Blast245套区,?生发中心B,不包括周围血CD24BA145,55,65全B,粒细胞,浆细胞CD25TAC55活化T和B(IL2受体)CD30Ki—190~110R-S细胞,活化T和BCD33MX967髓细胞,单核细胞CD34MY10,3C5115成髓细胞CD45LCA※,T29/33, PD7/26220白血细胞共同抗原(T,B,M)CD45RUCHL1※全TX4KB5※全B-TdT※-前B和前T,皮质胸腺细胞-L26※全B-HLA—DR (Ia-Like)-全B(不包括浆细胞)活化T(MHc II 类)※可用石蜡切片标记的McAb