《实用免疫细胞与核酸》 六、物理显影液及缓冲液的配制

（一）缓冲液的配制

（1）0.05mol/l pH7.4 TBS 配制

Tris（三羟甲基胺基甲烷）12.1g

NaCl 17.5g

加双蒸水1900ml

然后用浓HCL调至pH为7.4再加双蒸水至2000ml

Tris 　4.84g

NaCl 　17.5g

BSA 2.0g

NaN31.0g

双蒸水1900ml,充分搅拌至溶质完全溶解,用浓HCl调pH至8.2,再加双蒸水至2000ml。

（二）银显影液的配制

1．乳酸银显影液的配制：混合以下溶液

①10%阿拉伯胶水溶液60ml

②枸橼酸缓冲液pH 3.5 10ml

③对苯二酚1g,加双蒸水20ml溶解。

④乳酸银水溶液100 mg加水10ml。

注意在暗处显影。

2．硝酸银显影液的配制

①10%阿拉伯胶水溶液60ml。枸橼酸缓冲液ph 3.5 10ml

②对苯二酸1.7g水溶液30ml。

③硝酸银40mg水溶液2ml。

①②两溶液完全溶解，临用前加入硝酸银溶液。在暗处显影。

4．彩色显影液的配制

①0.2N氢氧化钠的异丙醇溶液5ml溶入100mgα-萘酚（或菲尼酮）。

②500mg碳酸钠，25mg溴化钾，50mg亚硫酸钠，加双蒸水25ml。

①②两液1：10混合，室温下彩色显影。

5．醋酸银显影液

①15%阿拉伯胶60ml，柠檬酸缓冲液10ml，pH3.5。

②对苯二酚1.7g溶于20ml蒸馏水中。

③醋酸银100mg溶于蒸馏水10ml中。

用前①②③依次混合，不需要避光，在室温下显影。

（三）柠檬酸缓冲液的配制

柠檬酸（C6H8O7.H2O）25.5g

柠檬酸三钠（Na3C6H5O7.2H2O）23.5g

加重蒸水100ml溶解即成，pH3.5

(四)氢氧化钠（NaOH）无水乙醇饱和溶液的配制

8g氢氧化钠，加入100ml无水乙醇振摇溶解即成。